Прямой иммунофлуоресцентный анализ (DFA) на грипп H1N1 ("свиной грипп") ненадежен у пациентов в отделении интенсивной терапии, согласно новому исследованию Стэнфордского университета. Существует множество методов диагностики гриппа, но данные о полезности и точности этих тестов на H1N1 все еще появляются, учитывая относительно недавнее начало эпидемии.
"Наши результаты показывают, что у пациентов с тяжелым гриппом H1N1, у которых быстрая и точная диагностика была бы наиболее важна, DFA, к сожалению, не работает хорошо. Это контрастирует с менее тяжелобольными пациентами, у которых DFA кажется вполне надежным." сказал Chanu Rhee, M.D., врач Медицинской школы Стэнфордского университета и ведущий автор исследования.
Результаты будут представлены на Международной конференции ATS 2010 в Новом Орлеане.
Несмотря на то, что ПЦР стал наиболее чувствительным и специфическим тестом для диагностики гриппа H1N1, доступность теста и время его проведения часто ограничивают его клиническую полезность. DFA-тестирование используется во многих учреждениях в качестве точного и быстрого средства диагностики гриппа. DFA для гриппа использует флуоресцентный краситель, прикрепленный к антителам, которые связываются с частицами гриппа. Если присутствует грипп, антитела связываются с вирусными антигенами, и с помощью специального микроскопа в образце можно увидеть яркое свечение.
Через несколько месяцев после начала пандемии H1N1 доктор. Ри и его коллеги из Стэнфордского университета заметили в своем учреждении тенденцию к тому, что тяжелобольные пациенты с гриппом H1N1 чаще имели отрицательные результаты DFA, чем пациенты с менее тяжелым заболеванием. Для дальнейшего изучения этого наблюдения они изучили записи всех пациентов, госпитализированных в больницу Стэнфордского университета с 20 мая 2009 г. по 30 января 2010 г. с гриппом H1N1. Все пациенты были подтверждены на грипп H1N1 с помощью ПЦР или вирусной культуры и прошли тестирование DFA на образце респираторного тракта. За период исследования в ОИТ поступили 19 пациентов; 11 потребовалась искусственная вентиляция легких, шестеро умерли от дыхательной недостаточности.
К их удивлению, доктор. Ри и его коллеги обнаружили, что, хотя DFA был довольно точным инструментом для диагностики H1N1 в некритических случаях, он совсем не точен для пациентов в отделении интенсивной терапии. Только пять из 19 пациентов в отделении интенсивной терапии (26 процентов) имели положительные результаты теста DFA на инфекцию H1N1 (четыре – с помощью мазка из носоглотки, один – с помощью бронхоальвеолярного лаважа), тогда как 27 из 33 пациентов без интенсивной терапии (82 процента) имели положительный тест DFA. Среднее время до первого DFA составляло семь дней для пациентов в отделении интенсивной терапии и три дня для пациентов, не находящихся в отделении интенсивной терапии. Из 31 образца дыхательных путей у пациентов из отделения интенсивной терапии, которые были положительными по результатам ПЦР, только 10 были одновременно положительными с помощью DFA.
"Для пациентов, не находящихся в отделении интенсивной терапии, чувствительность DFA была довольно хорошей и коррелировала с ранее опубликованными значениями. Однако мы обнаружили, что DFA значительно менее чувствителен у пациентов в критическом состоянии – у пациентов с тяжелым респираторным дистресс-синдромом, требующим искусственной вентиляции легких или высокой степени респираторной поддержки в условиях интенсивной терапии," сказал доктор. Ри. "Интересно, что ни один из образцов DFA, взятых из 18 эндотрахеальных аспиратов (выделений, взятых из дыхательной трубки у пациентов на аппарате искусственной вентиляции легких), не был положительным, несмотря на присутствие вируса, обнаруженного с помощью ПЦР или бронхоальвеолярного лаважа."
Доктор. Ри и его коллеги были удивлены их результатами, так как они ожидали, что тяжелобольные пациенты будут иметь более высокое бремя вирусных заболеваний, что упростит выявление. "Мы также ожидали, что образцы, взятые из эндотрахеального аспирата, где секреты поступают из нижних отделов дыхательных путей, будут иметь более высокую вероятность положительного результата, но это не так," сказал доктор. Ри.
Одно из возможных объяснений плохой эффективности DFA у пациентов в отделении интенсивной терапии заключается в том, что это чрезмерная воспалительная реакция хозяина, а не высокая вирусная нагрузка, которая ответственна за тяжелое заболевание. Однако остается неясным, почему у некоторых пациентов развивается тяжелая дыхательная недостаточность из-за H1N1, в то время как у других с аналогичными факторами риска развиваются только легкие симптомы.
Если будут подтверждены дальнейшие исследования, эти результаты имеют важные разветвления. "Это исследование подтверждает тот факт, что тяжелобольные пациенты с подозрением на грипп H1N1 должны быть помещены в респираторную изоляцию и без промедления получать противовирусное лечение, даже если тест на DFA отрицательный" сказал доктор. Ри. "Сюда входят пациенты с отрицательным DFA из образцов нижних дыхательных путей. Кроме того, всем тяжелобольным пациентам с подозрением на грипп H1N1 следует пройти ПЦР для подтверждения диагноза, поскольку ПЦР значительно более чувствительна, чем DFA, хотя и не идеальна."
"Следующим логическим шагом будет анализ данных гораздо большего числа пациентов из разных учреждений, чтобы подтвердить эти выводы," сказал доктор. Ри.